Наукові конференції України, Х Всеукраїнська науково-практична конференція «Біотехнологія XXI століття»

Розмір шрифту: 
ІНГІБУЮЧА ДІЯ ТИМЕНТИНУ НА AGROBACTERIUM TUMEFACIENS
І.С., І.Р., М.О., Б.В. Гнатюк, Горбатюк, Банникова, Моргун

Остання редакція: 2015-06-25

Тези доповіді


Agrobacterium-опосередкована трансформація рослин in vitro залежить від багатьох факторів, одним із яких є ефективна елімінація бактеріальних клітин. Зазвичай в якості антибіотика для пригнічення росту клітин Agrobacterium застосовують антибіотик цефотаксим. Однак, він негативно впливає на регенерацію з рослинних експлантів культивованих in vіtro [1]. У зв’язку з цим тривають пошуки «ідеального» антибіотика, який повинен бути стабільним, не чинити токсичного впливу на рослинний організм, а також бути відносно дешевим. Тому метою нашого дослідження було визначення ефективної концентрації тиментину, яка чинить максимальний інгібуючий вплив на Agrobacterium tumefaciens.

Методом дисків [2] вивчали інгібуючий ефект антибіотиків тиментину та цефотаксиму на штам АВІ Agrobacterium tumefaciens. Попередньо стерилізовані диски діаметром 6мм змочували розчинами антибіотиків та поміщали на поверхню агаризованого живильного середовища. Культивування проводили у термостаті за температури 27оС протягом 48 год. По закінченні зазначеного періоду проводили лінійні виміри діаметра зони інгібування навколо диска. Досліджували вплив наступних концентрацій антибіотиків: тиментин – 100 мг/л, 150 мг/л, 200 мг/л, 250 мг/л, 300 мг/л, 350 мг/л, 400 мг/л та цефотаксим – 100 мг/л, 200 мг/л, 300 мг/л, 400 мг/л, 500 мг/л, 600 мг/л, 700 мг/л. За літературними даними, тиментин повністю пригнічує ріст Agrobacterium при використанні концентрації 100-250 мг/л [1, 3], а цефотаксим – 500 мг/л.

Встановлено, що зона пригнічення діаметром 12,5 мм спостерігається при використанні розчину концентрацією 350 мг/л тиментину та 500 мг/л цефотаксиму (яка є загальноприйнятою). Таким чином, тиментин більш ефективно пригнічує ріст агробактерії у порівнянні з цефотаксимом. При збільшенні концентрації антибіотиків збільшується і зона інгібування А. tumefaciens.


Посилання


  1. Si-Nae Han: Effects of Antibiotics on Suppression of Agrobacterium tumefaciens and Plant Regeneration from Wheat Embryo / [Si-Nae Han, Poo-Reum Oh, Hong-Sig Kim, Hwa-Young Heo, Jun Cheol Moon, Sang-Kyu Lee, Kyung-Hee Kim, Yong-Weon Seo, Byung-Moo Lee] // Journal of Crop Science and Biotechnology. – 2012. – Vol. 2. – P.92-98.

  2. Mohana Priya A., Karutha Pandian S., Ramesh Manikandan: The Effect of Different Antibiotics on the Elimination of Agrobacterium and High Frequency Agrobacterium-mediated Transformation of Indica Rice (Oryza sativa L.) // Czech J. Genet. Plant Breed. – 2012. – Vol. 3. – P.120-130.

  3. Tang et al. An evaluation of antibiotics for the elimination of Agrobacterium tumefaciens from walnut of somatic embryos and for the effects on the proliferation of somatic embryos and regeneration of transgenic plants // Plant Cell Rep. – 2000. – Vol. 19. – Р. 881–887.