Мідь (Cu) є незамінним мікроелементом для всіх клітинних організмів, виступає кофактором для багатьох білків та ферментів, приймає участь в широкому діапазоні фізіологічних процесів, таких як фотосинтез, окисне – фосфорилювання і т.д.

Пшениця є культурою дуже чутливою до низьких концентрацій міді у ґрунті. За нестачі міді у рослин розвивається деформована (недорозвинена) квітконіжка (ефект «похиленої голови»). Причиною цього є погана лігніфікація тканини стовбура, що призводить до механічної слабкості та нездатності підтримувати колос. Проте, жито може ефективно поглинати мідь та рости навіть на дуже збіднених на мікро- та макроелементи ґрунтах. QTL даної ознаки у жита генетично локалізовані на довгому плечі 5R хромосоми, яка  була перенесена в геном пшениці з метою зниження чутливості культури до нестачі міді [Leach, 2004].

Ефективне визначення транслокації 4BS.4BL-5RL побудоване на основі ПЛР-аналізу. В роботі використовуються дві пари специфічних праймерів: BAMR F/BAMR R та AAM F/ААМ R [Leach R. Ch. 2004]. Прояв першої пари праймерів заснований на ідентифікації гена β-амілази-R1 жита та, як наслідок, пошук рослин із присутнім дистальним сегментом хромосоми жита 5RL. Друга пара праймерів, розроблена на ген α-амілази пшениці і дає позитивну реакцію тільки у присутності генома пшениці.

Наявність гена β-амілази-R1 у зразках, ми встановлювали за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) з парою праймерів BAMR F/BAMR R. Нами була розроблена програма апмліфікації: початкова денатурація 4 хв при 94 °С, 34 цикли – 30 с при 94 °С, 35 с при 59 °С і 1 хв при 72 °С та 5 хв при 72 °С фінальна елонгація. Очікувана довжина амплікону 550 п.н.

Для визначення наявності гена α-амілази у зразках пшениці, ми використовували специфічну пару праймерів AAM F/ААМ R. Програма апмліфікації: початкова денатурація 4 хв при 94 °С, 34 цикли – 30 с при 94 °С, 30 с при 60 °С і 1 хв при 72 °С та 5 хв при 72 °С фінальна елонгація. Очікувана довжина амплікону 800 п.н.

Продукти ПЛР розділяли та ідентифікували за допомогою електрофорезу у 1,6%-му агарозному гелі з бромистим етидієм.

Подальші дослідження будуть направлені на розробку дуплексної ПЛР для більш швидкої перевірки  зразків на наявність вказаної транслокації з наступним скринінгом вітчизняних та зарубіжних сортів пшениці з транслокацією 4BS.4BL-5RL.