Остання редакція: 2015-06-24
Тези доповіді
Флора та фауна сучасного світового океану ще з початку ХХ ст. забезпечує людство великою кількістю біологічно активних речовин. Цільові молекули з морських гідробіонтів застосовуються в сучасній біотехнології та фармакології. Розробка методів отримання певних білкових молекул з морських гідробіонтів є особливо актуальним завданням, оскільки такі біологічно активні речовини можуть володіти рядом функціональних особливостей і потенціально можуть стати привабливими біотехнологічними продуктами і бути успішно впроваджені у сучасній промисловості.
Метою роботи була розробка методологічних підходів для отримання та характеристики білкових молекул з тканин антарктичних гідробіонтів.
У дослідженнях використовувались заморожені зразки антарктичних морських гідробіонтів (Euphausia superba, Adamussium colbecki, Parborlasia corrugatus).
Для екстракції білкових молекул застосовувався 0,1 М фосфатний буфер, pH 7.4, що містив 0.15 M NaCl, 0,15 mM етилендіамінтетраацетат та 0,1 % Тритон Х-100. Електрофоретичний аналіз якісного білкового складу проводився в 10 % поліакриламідному гелі за присутності додецилсульфату натрію і показав наявність у зразках білкових молекул з молекулярною масою від 3 до 120 кДа.
Ідентифікація та аналіз гідролітичної активності зразків проводилась за допомогою ензим-електрофоретичного аналізу та специфічних субстратів. Встановлено наявність амідолітичної, амілолітичної, казеїнолітичної та естеразної активностей у досліджуваних зразках.
Фракцію трипсиноподібних ферментів, було отримано методом афінної хроматографії на колонці з бензамідин-сефарозою. Використовуючи сорбент конконавалін-А сефарозу було отримано фракцію глікопротеїнів.
Результати досліджень свідчать про високу ефективність у застосуванні розроблених методик для роботи з біологічно-активними молекулами білкової природи з тканин морських гідробіонтів.